广东东莞地区犬狂犬病抗体免疫效果调查

一３５一　嘲　中国动物检疫２００６年第２３卷第１２期　文章编号：１００５—９４４Ｘ（２００６）１２—００３５—０２　广东东莞地区犬狂犬病抗体免疫效果调查　张险朋　杨德胜谢海燕张端秀殷三鸿ｆ东莞市兽医防疫检疫站５２３０１０）　２．１狂犬病ＥＬＩＳＡ试剂盒：购白　狂犬病（Ｒａｂｉｅｓ，１是由狂犬病病　间狂犬病主要是由犬引起的＋约占　１．ＣＳ公司．批号为　毒（Ｒａｂｉｅｓ　ｖｉｍｓ１引起的人兽共患疾　总病例数的９８％。据广西１９８０—　法国ＳＹＮＢＩＯＴＩ病．人和所有温血动物对狂犬病毒　１９９４年的统计表明．没有进行犬只　６ＳＲＡＢ３０４。　都易感．该病广泛分布于全世界．是　免疫的地区狂犬病发病最高。而开　１．２．２狂犬病ＯＩＥ标准血清：法国　一种自然疫源性疾病。该病一旦发　展了狂犬病预防接种的地区随着犬　狂犬病ＯＩＥ参考实验室提供　病目前尚无法医治，死亡率为　免疫率的提高。人间狂犬病明显减　１．３方法　１００％．动物传染源广泛存在．控制　少…。就我国目前的实际情况。犬的　１．３．１将ＯＩＥ标准血清分别稀释７　难度很大　免疫在狂犬病的防制中仍不失为控　个浓度，分别为：１：１０，１：３０，１：１００，　２００４年－广‘东省共报告２４４例　制狂犬病的发生与蔓延的上策　鉴　１：１５０，１：３００，１：１　０６　和１：３　０００，　狂犬病病例．比２００３年上升了　于犬的狂犬病对于人类健康和畜牧　样品１：１０稀释。　４１．０４％，为近１０年来的最高峰，是　业生产的发展具有重要的社会和经　１．３．２　向每个酶标板微孔中加入　１９９５—２０ｏ２年同期平均发病数ｆ４３　济意义．２００６年我们在东莞市采集　９０　１样品稀释液，然后分别加人　例１的５．６７倍。据统计．所有病例均　了４６２份犬血清进行了免疫效果血　１０　ｌ阴性和阳性质控、１０　ｌ稀释　发病死亡，占全省甲、乙类传染病发　清调查．现报告如下　好的样品和１０　ＩＭＯＩＥ稀释血清（浓　病死亡总数的４１．３６％．位居传染病　１材料与方法　度从１：１０到１：３　０００）。质控、样品　发病死亡的首位　１．１被检血清　和各浓度的ＯＩＥ血清均做双孑Ｌ。　据统计在亚洲国家或地区．人　共４６２份．采自东莞市各镇区　３７ｃ【＝孵育１　ｈ　免疫狂犬病疫苗至少３０ｄ以上的犬　１．３．３用３００￣１洗液洗４遍．并在　东莞市科技局财政科技资金资助项目（编　只。　吸水纸上将检测板拍干。　号：５５００－Ｈ０６００４）　１．２试剂　１．３．４用酶标记物稀释液１：１０稀　试管凝集试验按国标判定标　４结果分析　由于试管凝集试验　合试验是两种不同的试验方法．所　准，奶牛１：５０血清稀释，出现“＋＋”　和补体结合试验是两种不同实验方　判定的结果不同．如果把补体结合　以上的凝集现象时．受检血清判定　法．根据免疫球蛋白的四链基本结　试验做为奶牛布病监测的最终判定　为可疑．经３—４周后重检．如果仍为　构，布病阳性血清中的抗体．与免疫　结果．将有３５．９％试管凝集试验阳　可疑．该牛判为阳性。而在实际生产　球蛋白的抗原结合点的不同．试管　性奶牛被漏判为阴性。在这段时间　中有时往往忽视对可疑奶牛的重　凝集试验免疫球蛋白抗原结合部在　里，由于奶牛间的相互接触．增加了　检．将其视为阴性奶牛继续混群饲　免疫球蛋白两个相同的Ｆａｂ片段即　奶牛布病的传播速度和数量．从而　养。通过２个小区在连续５次检测　Ｆ（ａｂ）２。补体结合试验免疫球蛋白　导致疫情的扩散　但如果只使用试　２０３４头奶牛中．检出试管凝集试验　抗原结合部在免疫球蛋白Ｆｃ片　管凝集试验．不进行补体结合试验．　１：５０奶牛５０头，将这５０头奶牛送　段。免疫球蛋白在正常情况下．两个　将有２４％的可疑奶牛被漏判为阴　进行补体结合试验．其结果检出阳　Ｆａｂ片向后弯曲，掩蔽了补体结合　性　因此．我站通过以上大量调查和　性奶牛１２头．补体结合试验阳性数　点。与抗原结合时，铰链区展开，使　试验数据．建议市级指定兽医复检　占１：５０试管凝集试验可疑阳性数　补体结合点暴露．因此抗体只有在　单位进行奶牛复检时．应采取试管　的２４％．由此我们在奶牛监测工作　与抗原结合后才能结合补体，　从而　凝集试验和补体结合试验相结合的　中，决不能忽视对试管凝集试验１：　使试管凝集试验和补体结合试验的　原则．经专家论证．于２００４年底被　５０的可疑奶牛应尽早采取隔离监　试验结果具有一定差异　市级指定兽医复检单位所采纳　测和净化措施　５小结试管凝集试验和补体结　维普资讯 http://www.cqvip.com

中国动物检疫２００６年第２３卷第１２期　一３６一　释酶标记物．向每个酶标板微孑Ｌ中　占４０．３虽然目前评价一种疫苗免疫　６８％．大于０．１５ＥＵ／ｍｌ占　３．加入１００　ｌ稀释的标记物。３７℃孵　３８．９８％。（详见表２）　育１　ｈ。　３讨论　是否成功依据抗体水平的高低来判　断．不是很全面的．在抗狂犬病感染　１．３．Ｓ重复１．３．３操作，加入１００　ｌ　３．１我市动物使用的狂犬病疫苗　方面．细胞免疫和体液免疫都起了　过氧化物酶底物．室温２０℃孵育３０　有多联苗和单联苗．犬的免疫率大　重要的作用例．但是抗体水平在一定　ａｉｎｏ　ｒ概为８６．２％　从这次调查的结果来　的程度上反映了免疫效果　文献报　１．３．６加入５０１ｘｌ终止液．在４５０ｎｍ　看．犬的狂犬病免疫抗体水平普遍　道了狂犬病毒中和抗体与炎细胞协　波长参考波长为６３０　ｎｍ读数　偏低，不足以抵抗野毒的侵袭。免疫　同作用对清除中枢神经系统内狂犬　ｌ３．７用ＳＹＮＢ１０ＴＩＣＳ软件对结果　多联疫苗的犬只的狂犬病抗体水平　病毒感染起了十分重要的作用【ｍ　目　进行分析　以ＯＩＥ血清浓度的对数　比较低，抗体阳性率只有７．６９％，抗　（Ｉｎ）值为ｘ轴，Ｉｎ（ＯＤ）值为Ｙ轴，绘　体水平小于０．３ＥＵ／ｍｌ的血清占了　出ＯＩＥ标准血清的标准曲线。用ＯＩＥ　８４％：免疫单联疫苗的犬抗体水平　标准血清的所有ＯＤ值．建立ＯＩＥ血　稍好一点，免疫合格率有５２．２４％．　清的浓度的对数（Ｉｎ）和Ｉｎ（ＯＤ）值的　但抗体水平低于０．３ＥＵ／ｍｌ也占了　线性回归曲线．建立相对数学公式　４０．６８％。由此可以看出，疫苗的质　为：Ｉｎ（狂犬病抗体浓度（ＥＵ／ｍ１））＿ａ＋　量，是造成免疫失败的主要因素。疫　ｂ￣Ｉｎ（ＯＯ）．样品狂犬病抗体的浓度　苗免疫是狂犬病防制最有效的手　（ＥＵ／ｍ１）＝ｅ（ａ＋ｂ￣Ｉｎ（ＯＤ））。　段．这早已是不争的事实　但一个先　２结果　决条件就是免疫疫苗的质量要有保　２．１根据试剂盒的说明．经免疫狂　证　目前我国市场上流通的犬狂犬　犬病疫苗的犬．ＥＬＩＳＡ检测其抗体　病疫苗，其质量良莠不齐，这是造成　滴度大于０．６ＥＵ／ｍｌ则能抵抗野毒　免疫失败的一个主要的原因　ＷＨＯ　的侵袭．抗体滴度小于０．６ＥＵ／ｍｌ动　专家委员会建议对兽用灭活疫苗的　物没有被保护．容易受到野毒的感　效力按ＮＩＨ法测定．效价不应低于　染。在检测的４６２份犬血清中．抗体　１．０ＩＵ／￣：Ｊ］　因此加强疫苗出厂前的效　阳性数６２份．抗体阳性率为　价检定很重要．出厂后疫苗的运输　１３．４２％．其中检测免疫狂犬病多联　和保管也不能忽视．有条件的还应　疫苗血清４０３份．抗体阳性数３１　对出厂后疫苗的运输．储存和免疫　份。抗体阳性率７．６９％．检测免疫狂　前的各个环节进行监控　犬病单联疫苗血清５９份．抗体阳性　３．２操作人员专业技术技能对免　数３ｌ份，抗体阳性率５２．２４％。（结　疫效果也有影响　疫苗的免疫看似　果详见表１）　简单．但也有不可忽视的一些问题，　表１　狂犬病免疫抗体检测结果　比如免疫注射的部位．剂量．稀释浓　度是否标准．疫苗的温度是否与要　求相符　犬的生理指标和身体状况　是否具有免疫应答的能力　如果其　中的某个环节出现问题．都可能造　２．２免疫多联疫苗犬只的狂犬病　成免疫的失败。动物对疫苗的免疫　抗体水平普遍比较低．小于０．３ＥＵ／　反应随疫苗的类型、剂量和免疫次　ｍｌ的血清占８４％。免疫单联疫苗犬　数、免疫时的年龄、动物当时的身体　只狂犬病抗体水平小于０．３ＥＵ／ｍｌ　状况等而变化　表２狂犬病免疫抗体水平分布　前体外检测的狂犬病抗体的方法有　ＥＬＩＳＡ、ＤＩＡ及ＩＨＡ，其所测得的抗　体可能包括一些非特异性的抗体蛋　白．专家将其检测结果严格定义为　等价单位（ＥＵ／ｍ１）．但是体外检测试　剂在实验条件、专业技术水平．时间　及操作等方面较推荐的ＭＮＴ和　ＲＦＦＩＴ基本方法有明显的优势　３．４随着社会的发展．我国的国情　告诉我们我国的宠物犬热在近几十　年内不会“降温”．在狂犬病的防制　方面，应从“管、免、灭和检疫、监测”　等方面采取措施。加强对犬、猫的管　理　另外．在控制野生动物狂犬病方　面我们不妨学一下发达国家狂犬病　控制的经验　例如上世纪７０年代瑞　士采取了大面积对野生动物在野外　投口服疫苗诱饵．历时１０年瑞士的　狂犬病发病下降８０％［４１　国家应　投资研究、开发、生产，应用飞机投　放疫苗诱饵．使野生动物建立免疫　群．消除传染源，切断传染途径。为　早日消灭狂犬病作贡献。　参考文献　『ｌ１吴泰才，王树声。黄达春．广西１５　年来狂犬病疫情分析『Ｊ１．中国人兽　共患病杂志．１９９５。１　１（６）：１６５　『２１艾智武，肖鼎昌．狂犬病毒抗原刺　激小鼠的细胞免疫反应试验『Ｊ１．中　国人兽共患病杂志。２０００，１６（３）：６３　【３］Ｈｏｏｐｅｒ　Ｄ　Ｃ，Ｍｏｒｉｍｏｔｏ　Ｋ，Ｂｅ—　ｔｋ　Ｍ．ｅｔ　ａ１．Ｃｏｌｌａｂｏｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｎｔｉ－　ｂｏｄｙ　ａｎｄ　ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｃｌｅａｒａｎｃｅ　ｏｆ　ｒａｂｉｅｓ　ｖｉｒｕｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｃｅｎｔｒａｌ　ｓｙｓｔｅｍ［Ｊ］．＿Ｉ　Ｖｉｒｏｌ，１９９８，７２：３７１　１—３７１９　【４］ＺＥ明俊等．兽医生物制品学［Ｍ】．北　京：中国农业“ｊ版社，１９９６，６８３