技术遮递Ｊ 科研ＡＧＲＩＣＵＬＴＵＲＡＬ ｌＮＦＯＲＭＡＴＩＯＮ ｌ ．生产 农用灌溉水中７种农药残留高效液相色谱分析方法 熊佳梁 ，唐加敏 ，胡晓旭ｚ，赵伟良１，刘营仙１，马荣宪 （１．云南省大理州农产品质量安全监督检验测试中心，大理６７１０００；２．云南省大理市农产品质量安全检测站，大理６７１０００） 摘要：建立了一种测定农用灌溉水中７种农药残留的高效液相色谱法。水样经液萃取后无需进行ＳＰＥ小柱净 化处理，旋蒸浓缩后过０．２２１ｘｍ有机滤膜，采用ｕＶ检测器检测。外标法定量。结果表明：７种农药的出峰时间在 ３．１６２—８．９８０ｒａｉｎ，在０．０１）．４５ｍ／Ｌ范围内，平均加标回收率在７９．２％ １ １５．６％之间，相对标准偏差为０．１４％，－４．３％，相关 系数在０．９９９１７４）．９９９９０之间。最低检出限为９．７０ｘ１０－４￣３．０６ｘｌＯ－３ｍｇ／Ｌ。该方法具有简单、快捷、准确、灵敏的优点。 关键词：高效液相色谱（ＨＰＬＣ） 农药残留水 由于农药的大量使用．农用灌溉水中的农残污染问 加入２．０ｍｌ甲醇。将上述溶液完全转移到１０ｍｌ离心管中， 题已经影响了人们的生活和生产【１】。目前国家在农用灌 在用甲醇少量多次的冲洗鸡心瓶．并完全转移至离心管 溉水中农药残留检测的方法和依据也不完善。有关高效 中．大约６ｍｌ左右。将离心管放到水浴温度为４２％的氮 液相色谱测定农药残留的报道已有很多嘲．但这些方法 吹仪上，氮吹蒸发至２．５ｍｌ以下，用甲醇定容至２．５ｍｌ，在 的前处理都较为复杂。直接利用溶剂萃取机进行液液萃 漩涡混匀器上混匀．将定容后的溶液过０．２２１ｘｍ有机膜微 取，萃取效率高，而且无需用ＳＰＥ小柱净化，节省了实 孔滤膜装入进样瓶中，等待下一步仪器分析。 验材料很适于实际批量样品的分析。该文建立了农用灌 １．４色谱条件 溉水中７种农药残留的分析方法．优化了相关的实验条 流动相为甲醇＋乙腈（７＋３）和水；梯度洗脱程序：０ 件，对方法的线性范围、最低检出限、回收率及变异系 ６ｍｉｎ。甲醇＋乙腈由３０％线性升至３５％；６－６．５ｍｉｎ，甲 数等进行了考察。 醇＋乙腈由３５％线性升至８０％：６．５～７．９ｍｉｎ，甲醇＋乙腈由 ８０％线性升至１００％：７．９ １２ｍｉｎ．甲醇＋乙腈保持１００％。 检出波长：０ １２ｍｉｎ，２４５ｎｍ、２５４ｎｍ、２７５ｎｍ、２８０ｎｍ全 扫。柱温：４０％。进样量：２．５ ｌ。 １材料与方法 １．１药品与溶液配制 农药标准品（吡虫啉、啶虫脒、多菌灵、除虫脲、 灭幼脲、辛硫磷、阿维菌素）农业部环境保护科研监测 所，以上农药标准品纯度均≥９９％，浓度均为１０００ｍｇ／Ｌ。 ２结果与讨论 ２．１样品液的提取与净化 甲醇、乙腈和二氯甲烷均为色谱纯。将上述标品的质量 浓度配制为５．Ｏｍ异，Ｌ，在４℃条件下保存。 １－２仪器设备 样品液的提取与净化是实验极为重要的环节．要是 过程比较复杂容易引起样品的损失。该文筛选了可以进 行液液萃取的３种溶剂：石油醚、二氯甲烷和正己烷进 行了提取回收率的比较。选择了二氯甲烷作为提取溶液， ＡｇｉｌｅｎｔＨＰＬＣ一１２９０，配有紫外检测器（ｕＶ）；色谱柱： ７５ｍｍｘ２．１ｍｍｘ２．７ ｍ；全自动溶剂萃取机（ＡＰＬＥ一２０００）； 氮吹仪；漩涡混合仪；旋转蒸发仪。 １．３样品的前处理 在全自动溶剂萃取机上提取，旋转蒸发浓缩，然后用甲 醇定容，过０．２２１．Ｌｍ有机膜微孔滤膜，直接上仪器，过程 较为简便，省去了净化步骤．而且能满足检测需要。 量取５０．０ｍｌ的水样于全自动溶剂萃取机中．用 ２－２色谱条件的优化 ５０．０ｍｌ的二氯甲烷萃取．收集全部萃取液于ｌＯＯｍｌ鸡心 ２．２．１流动相的选择 瓶中，然后水浴温度为３６℃的旋转蒸发仪上旋至近干． 该文尝试了选用甲醇和水、乙腈和水、不同配比的 中国农业信息／２０１５．０３ １１１ 科研．生产 甲醇＋ＬＮ和水为流动相．通过实验对比后发现只有以甲 表２回收率及精密度实验结果 醇＋乙腈（７＋３）和水为流动相时，分离度能达到要求， 并能获得较为理想的色谱图，如图１所示。 注：ＢＣＬ一吡虫啉：３．１６２ｍｉｎ，ＤＣＭ一啶虫脒：４．２４０ｍｉｎ， ＤＪＬ一多菌灵：４．６２８ｍｉｎ，ＣＣＮ一除虫脲：８．４１３ｒａｉｎ。ＭＹＮ一灭幼 脲：８．４７８ｍｉｎ．ＸＬＬ一辛硫磷：８．５５８ｍｉｎ，ＡＷＪＳ一阿维菌素： ８．９８０ｍｉｎ ２．２．２流速的选择 按照以上色谱条件比较了不同流速对分析的影响． 当流速为１．０ｍｌ／ｍｉｎ时．吡虫啉的出峰时间太快．啶虫脒 和多菌灵的分离度达不到要求：当流速为０．８ｍｌ／ｍｉｎ时， 吡虫啉的出峰时间还是太快且靠近死时间．从而会影响 定量分析：当流速为０．５ｍｌ／ｍｉｎ时，能够得到理想的分离 度：当流速继续减小时．吡虫啉出现平头峰，而且延长 表１不同处理土壤ｐＨ的测定结果 了分析时间．综合考虑上述的情况．选择流速为０．５ｍｌ／ ｍｉｎｏ ２．２．３检测波长的选择 在上述色谱条件下．用ＡｇｉｌｅｎｔＵＰＬＣ一１２９０型所配的 紫外检测器对分离后的７种农药标准溶液在１９０ ４００ｎｍ 波长范围内进行扫描．得到了各农药的紫外一可见吸收 １１２中国农业信息，２０１５．０３ 光谱图以及最佳紫外一可见吸收光谱波长，吡虫啉、啶 虫脒、多菌灵、除虫脲、灭幼脲、辛硫磷、阿维菌素的 最佳紫外一可见吸收光谱波长分别为：２７５ｎｍ、２４５ｎｍ、 ２８０ｎｍ ２７５ｎｍ ２５４ｎｍ ２８０ｎｍ ２４５ｎｍ ２．４方法的线性关系和检出限 配制５个不同浓度的７种农药混合标样．按１．４的色 谱条件分析．外标法定量。以峰面积ｙ对浓度ｘ做线性回 归分析．线性方程和检出限（Ｓ／Ｎ＝３）见表１。 ２．５方法的准确度与精密度 在水空白样品中添加３种浓度的农药混标．进行回 收实验．每个样品在同一添加水平重复３次．回收率及 精密度如表２所示。 ２．６样品的测定 对云南省宾川县拉乌乡有机烟叶地的灌溉用水．按 本方法进行分析。结果显示，７种农药均未检出。 ３结论 该文建立了７种农药在农用灌溉水中残留量的测定 方法，操作简单，无需进行ＳＰＥ小柱的净化处理，回收 率与精密度均能达到要求．结果令人满意。