Ｈａｉｎａｎ Ｍｅｄ Ｊ，Ｆｅｂ．２０１４，Ｖｏ１．２５，Ｎｏ．４ 海南医学２０１４年２月第２５卷第４期 ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００３—６３５０．２０１４．０４．０２０３ ・论 著・ 多发性骨髓瘤患者血清ＩＬ一３３和ＩＬ一６水平的变化及其临床意义 高树雨 ，牛淑丽 （１．康保县人民医院检验科，河北张家口０７５０００； ２．张家口市第四医院检验科，河北张家口０７５０００） 【摘要】 目的检测多发性骨髓瘤（Ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｍｙｅｌｏｍａ，ＭＭ）患者血清中ＩＬ一３３和ＩＬ一６水平，探讨其在疾病发 展中的作用。方法选取２０１２年１月至２０１３年１月间３７例多发性骨髓瘤患者和５Ｏ例健康对照者作为研究对 象，应用ＥＬＩＳＡ方法检测所有研究对象血清中ＩＬ一３３和ＩＬ一６水平，并进行统计学分析。结果两组研究对象的 ＩＬ一３３检出率差异无统计学意义；ＩＬ一３３水平与ＭＭ分期呈负相关，ＭＭ患者ＩＬ一３３水平与健康对照者相比显著降 低，其差异具有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；Ｉ卜６水平与ＭＭ分期呈正相关，ＭＭ患者ＩＬ一６水平与健康对照者相比显著 升高，其差异具有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。结论ＭＭ进展过程中ＩＬ－３３和ＩＬ－６分泌改变可能导致免疫失衡而使 疾病逐步恶化，其有助于病情监测和为免疫治疗提供理论依据。 【关键词】ＩＬ一３３；ＩＬ一６；多发性骨髓瘤；相关性 【中图分类号】Ｒ７３３．３ 【文献标识码】Ａ 【文章编号】 １ｏ０３—６３５Ｏ（２Ｏ１４）０４—Ｏ５２９—０２ Ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ＩＬ－３３ ａｎｄⅡ 一６ ｌｅｖｅｌ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｍｕｌｉｐｉｔｅ ｍｙｅｌｏｍａ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ．ＧＡ０ Ｓｈｕ－ｙｕ １． ＾ ｕ－２ １．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ￣ｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｐｅｏｐｌｅ＂ｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｆＫａｎｇｂａｏ．Ｚｈａｎｇｏｉｆａｋｏｕ ０７５０００，Ｈｅｂｅｉ，ＣＨＩＮＡ；２． ＤｅｐａｒｔｅｎｔｏｍｆＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，ｔｈｅＦｏｕｒｔｈＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＺｈａｎｇｉｉａｋｏｕ．Ｚｈａｎｇｉａｋｆｏｕ０７５０００，Ｈｅｂｅｉ，ＣＨｌＮＡ 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ｔｈｅ ｓｅｒｕｍ １ｅｖｅｌｓ ｏｆ ＩＬ一３３ ａｎｄ ＩＬ一６ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｍｙｅｌｏｍａ，ａｎｄ ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅｉｒ ｒｏｌｅ ｉｎ ｄｉｓｅａｓｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｆｒｏｍ Ｊａｎ．２０１２ ｔｏ Ｊａｎ．２０１３，３７ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｏｆｍｕｌｔｉｐｌｅ ｍｙｅｌｏｍａ （ＭＭ）ａｎｄ ５０ ｈｅａｌｔｈｙ ｃｏｎｔｒｏｌｓ ｗｅｒｅ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ａｓ ｔｈｅ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｂｊｅｃｔｓ．ＥＬｌＳＡ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ｈｅ ｓｔｅｒｕｍ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ＩＬ－３３ ａｎｄ ＩＬ一６．Ｄａｔａ ｗｅｒｅ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙ ｎａｌａｙｚｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ＩＬ一３３ ｓｈｏｗｅｄ ｎｏ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙ ｓｉｇｎｉｆｉ－ ｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ｔｗｏ ｇｒｏｕｐｓ．ＩＬ一３３ ｌｅｖｅｌｓ ｗｅｒｅ ｎｅｇａｔｉｖｅｌｙ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ ｗｉｍ ＭＭ ｓｔａｇｅ．ａｎｄ ＩＬ一３３ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ＭＭ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｈ ｔｈｅａｌｈｙ ｔｃｏｎｔｒｏｌｓ ｆＰ＜０．０５）．ＩＬ一６ ｌｅｖｅｌｓ ｗｅｒｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ＭＭ ｓｔａｇｅ．ａｎｄ ＩＬ－６ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ＭＭ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｈｅａｌｔｈｙ ｃｏｎｔｒｏｌｓ（Ｐ＜ ０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ＩＬ一３３ ｎｄ ａＩＬ一６ ｌｅｖｅｌｓ ｍａｙ ｐｒｏｍｏｔｅ ｈｅ ｔｐｒｏｇｒｅｓｓ ｏｆ ＭＭ ｂｙ ａｄｊｕｓｔｉｎｇ ｔｈｅ ｃｅｌｌｕｌｒ ａｉｍ－ ｍｕｎｉｔＹ，ａｎｄ ｍａｉｎｔａｉｎｉｎｇ ｔｈｅ ｂａｌｎｃｅ ａｏｆＴ ｅｅｌｌ ｓｕｂｇｒｏｕｐ ｍａｙ ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅ ｔｏ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆｍｙｅｌｏｍａ ｄｉｓｅａｓｅ． 【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】 ＩＬ一３３；ＩＬ一６；Ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｍｙｅｌｏｍａ；Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ 多发性骨髓瘤（Ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｍｙｅｌｏｍａ，ＭＭ）是骨髓中 名，女性２７名，平均年龄（６０．１￣５．８）岁，其基本人ＶＩ学 具有可比性。 长寿浆细胞恶性增殖性疾病。瘤细胞在骨髓发展，造 特征与观察组比较差异无统计学意义，成骨质破坏，与正常浆细胞相似，ＭＭ细胞的存活及其 所有研究对象均无急性感染、炎症性疾病、糖尿病、肥 基本细胞因子的产生必须依赖于与骨髓基质细胞 。 胖、神经系统疾病或其他系统疾病。 ＭＭ的发病机制复杂，累及免疫细胞，存在免疫球蛋 １．２ 方法所有研究对象于人院或体检当天抽 白恶性克隆，患者有严重的体液免疫缺陷，除此以外 取静脉血，离心分离血清一２０￣１２，并应用ＥＬＩＳＡ检测 检测血清中ＩＬ一３３和 患者还存在细胞免疫功能紊乱及细胞因子失衡，机体 试剂盒（购于美国Ｒ＆Ｄ公司）免疫状态极其低下。ＩＬ一３３是ＩＬ－１家族新近发现的 成员，由内皮细胞和上皮细胞表达口１，可能调节不同 器官中Ｔｈ２型细胞的转变而参与免疫调节口】。ＩＬ一６则 主要由骨髓基质细胞分泌，参与ＭＭ细胞的生长与发 育。本研究检测ＭＭ患者ＩＬ一３３和ＩＬ－６水平的变化， 探讨细胞因子在ＭＭ发展中的临床意义。 １资料与方法 １．１一般资料选取２０１２年１月至２０１３年１月 间于我院进行诊治的３７例ＭＭ患者作为观察组，其 中男性１６例，女性２１例，平均年龄（５９．７￣６．８）岁。所 有人选患者在进行研究前７ ｄ未接受任何ＭＭ治疗。 选取同期５０例健康体检者作为对照组，其中男性２３ 通讯作者：高树雨。Ｅ—ｍｍｌ：ｇａｏｓｈｕｙｕ１９７３＠１６３．ｃｏｍ ＩＬ－６含量，严格按照试剂说明书进行操作。 １．３统计学方法 应用ＳＰＳＳ１３．０软件对所得 数据进行统计学分析，正态分布数据以均数士标准差 ）表示，非正态分布数据使用四分位距（Ｉｎｔｅｒｑｕａｒ． ｔｉｌｅ ｒａｎｇｅ，ＩＱＲ）和范围进行描述。计量资料的比较采 用Ｍａｎｎ—Ｗｈｉｔｎｅｙ Ｕ检验，计数资料比较采用ｚ 检验。 两变量问的相关性分析用Ｓｐｅａｒｍａｎ相关分析，以Ｐ＜ ０．Ｏ５为差异具有统计学意义。 ２结果 ２．１基本特征根据Ｄｕｒｉｅ．Ｓａｌｍｏｎ分期体系对 ＭＭ患者进行分类，其中ＭＭ Ｉ期９病，Ⅱ期１１例，Ⅲ期 １７例；免疫球蛋白亚类中，２１例为ＩｇＧ，１５例为ＩｇＡ，１例 ・５２９・ 海南医学２０１４年２月第２５卷第４期 Ｈａｉｎａｎ Ｍｅｄ Ｊ，Ｆｅｂ．２０１４，Ｖｏ１．２５，Ｎｏ．４ 为非分泌性；２ １例患者有溶解性骨病和 芮理陛骨折。 ２．２ ＩＬ一３３和ＩＬ一６水平与疾病相关性１９例 ＭＭ患者（５１．４％）和２４例健康对照者（４８．０％）可检测 出ＩＬ一３３，两组间检出率比较差异无统计学意义（ｘ ＝ ０．３１７，Ｐ＝Ｏ．７２９），但两组间ＩＬ一３３水平存在区别，随着 ＭＭ分期增加，ＩＬ一３３水平值逐渐降低，与对照组比较 差异具有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０５）。ＩＬ一３３水平与ＭＭ分 期呈负相关，相关系数为一０．６２８，Ｐ＝－０．００６。随着ＭＭ 分期增加，ＩＬ一６水平值逐渐升高，与对照组比较，差 异具有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。ＩＬ一６水平与ＭＭ分期 最近添加一员，属ＩＬ一１家族。有研究表明ＩＬ一３３是各种 炎症性疾病的潜在介质，诱导效应因子的释放，起到调 节免疫应答的功能ｐ】。ＩＬ一６是骨髓细胞的关键性生长因 子，既可刺激肿瘤细胞生长又可抗肿瘤。通过促进浆细 胞的增殖与分化，增加免疫球蛋白的分泌；还可诱导多 种免疫细胞增殖分化成为抗原特异性效应细胞，起到免 疫防御作用 。不同研究结果得出的ＩＬ一３３检出率存在 区别ｐ】，本研究使用进口ＥＬＩＳＡ试剂盒，检测敏感『生高， 研究结果表明ＭＭ患者及健康对照者ＩＬ一３３检出率差 异无统计学意义，与以往的研究有区别。研究结果显示 呈正相关，相关系数为０．５９３，Ｐ＝０．００９，见表１。 表１不同研究对象 一３３和 ＿６水平检测结果 注：与健康对照组比较，．Ｐ＜０．０５。 ２－３不同特征分类后ＭＭ患者的ＩＬ一３３和ＩＬ一６ 水平比较将所有Ｍ］Ｖｌ患者根据不同的特征进行分 类后再比较其ＩＬ一３３和ＩＬ一６的水平，结果显示肾衰 ＭＭ患者血清中ＩＬ一３３水平较非肾衰ＭＭ患者降低 （ ＝３．８８２，Ｐ＜０．０５），而ＩＬ一６水平则较非肾衰ＭＭ患者 升高（ ＝５．３２３，Ｐ＜０．０５）；有无溶骨病变患者血清中两 种细胞因子差异均无统计学意义（ＩＬ一３３： ＝Ｏ．５６８，Ｐ＞ ０．０５；ＩＬ一６： ＝Ｏ．２２７，Ｐ＞０．０５），见表２。 表２按不同特征分类后ＭＭ患者ＩＬ－３３和几一６水平的比较 组别 例数 ）ＩＬ一３３（ｐｇ／ｍｌ，ｍＱ）ＩＬ一６（ｐｇ／ｍｌ， ） 注：肾衰ＭＭ患者肌酐水平＞８８．４ ｕｍｏｌ／ｌ，非肾衰ＭＭ患者肌酐水 ￣ｚ＜８８．４ ｕｍｏｌ／ｌ。 ３讨论 随着我国老龄化的逐步加快，ＭＭ患者发病率呈上 升趋势，其发病机制至今仍未完全阐明，其发展涉及一 系列骨髓微环境的变化，趋向于利于肿瘤的生长和局部 免疫控制的失调。已经发现ＭＭ患者ＣＤ４＋和ＣＤ。 Ｔ细 胞数量减少和功能减弱，且患者细胞免疫缺陷程度与生 存率呈负相关Ｈ】。ＭＭ中还存在Ｔｌ１１与Ｔｈ２的不平衡， Ｔｈｌｆｒｈ２比例在肿瘤免疫中发挥有重要作用。Ｏｇａｗａｒａ 等 研究发现初发、复发阶段的ＭＭ患者Ｔｈｌ／Ｔｈ２比例 较健康对照组高，且与外周血口：—微球蛋白呈正相关，认 为ＴｈＹＴｈ２比例失常与ＭＭ疾病进展存在相关性。细胞 因子及其受体在疾病的发展、免疫系统的维持和正常运 转中起着重要作用。在ＭＭ发生时，这些相互作用可能 发生异常后果口】。ＩＬ一３３是不断增加的细胞因子家族中 ・５３０・ 随着ＭＭ分期的增加血清中ＩＬ一３３浓度显著下降，ＩＬ一６ 水平呈上升趋势，与健康对照者比较差异有统计学意义 （Ｐ＜０．０５）；ＩＬ一３３水平与ＭＭ疾病分期呈负相关（相关系 数为－０．６２８，Ｐ＜０．０５），ＩＬ一６水平与１ＶＩＭ疾病分期呈负相 关（相关系数为一０．５９３，Ｐ＜０．０５），疾病恶性程度越高 ＩＬ一３３水平越低，ＩＬ一６水平越高。ＩＬ一３３使细胞免疫应 答像Ｔｈ２型反应倾斜，ＩＬ一６则在ＭＭ发挥了刺激肿瘤细 胞生长的作用，血清中ＩＬ一３３和ＩＬ一６水平的变化可能参 与ＭＭ患者免疫系统功能的改变，能够解释ＭＭ患者中 检测到的Ｔｈｌ／Ｔｈ２比例失常 】。 根据不同特征将ＭＭ进行分组后再次进行比较 发现不同组间ＩＬ一３３水平差异无统计学意义（Ｐ＞ ０．０５）；肾衰ＭＭ患者ＩＬ一６水平较非肾衰患者显著增 高，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５），表明ＩＬ一６参与了 ＭＭ患者肾损伤免疫功能紊乱进程。 本研究结果表明在ＭＭ进展过程中ＩＬ一３３和 ＩＬ一６分泌改变可能导致免疫失衡而使疾病逐步恶 化，有助于更好地理解ＭＭ患者中细胞免疫功能的变 化，维持Ｔ细胞亚群的平衡可能是控制ＭＭ发展的一 种方法。血清炎性因子ＩＬ一３３和ＩＬ一６对于ＭＭ病情 监测、疗效评价和免疫治疗提供了客观标准，可以有 效指导临床诊断和治疗。 参考文献 Ａｎｄｈａｖａｒａｐｕ Ｓ，Ｒｏｙ Ｖ Ｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｏｒｙ ｄｒｕｇｓ ｉｎ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｍｙ— ｅｌｏｍａ［Ｊ】．Ｅｘｐｅｒｔ Ｒｅｖ Ｈｅｍａｔｏｌ，２０１３，６（１）：６９—８２． ［２】 武燕，柳晓金，李明才．ＩＬ一３３／ＳＴ２信号转导系统及其与疾病关 系的研究进展［Ｊ］．现代免疫学，２０１０，３Ｏ（２）：１６４—１６７． ［３］ Ｊ￣ｈｒｅｒ Ｋ，Ｈｏｆｂａｕｅｒ ｓｗ，Ｚｅｌｌｅ—Ｒｉｅｓｅｒ Ｃ，ｅｔ ａ１．Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ－ｄｅｐｅｎ— ｄｅｎｔ Ｂ ｃｅｌｌ—Ｔ ｃｅｌｌ ｉｎｔｅｒａｃｔ ｉｏｎｓ ｉｎ ｃｈｒｏｎｉｃ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ ｌｅｕｋｅｍｉａ ａｎｄ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｍｙｅｌｏｍａ—ｔａｒｇｅｔｓ ｆｏｒ ｔｈｅｍｐｅｎｔｉｃ ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ？［Ｊ］．Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｏｎ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｔｈｅｒａｐｙ，２０１２，１２：４２５－４４１． ［４］曾美秀，邱国强，韩文敏，等．多发性骨髓瘤患者外周血Ｔｈｌ／Ｔｈ２ 及ｃＤ ＣＤ：ｓ＋Ｔｒｅｇｓ的表达分析［Ｊ］．细胞与分子免疫学杂志，２０１０， ２６（４）：３８２—３８４． 【５］Ｏｇａｗａｒａ Ｈ，Ｈａｎｄａ Ｈ，Ｙｍａｚａｋｉ ｅｔ ａ１．Ｈｉｇｈ Ｔｈｌ／Ｔｈ２ ｒａｔｉｏ ｉｎ ｐａ— ｔｉｅｎｔｓ、ｖｉｃｈ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｍｙｅｌｏｍａ【Ｊ】．Ｌｅｕｋ Ｒｅｓ，２００５，２９（２）：１３５—１４０． 【６】Ｏｈｇｉｙａ Ｄ，Ｍａｔｓｕｓｈｉｔａ Ｈ，Ｏｎｉｚｕｋａ Ｍ，ｃｔ ａ１．Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏｍｙｅｌｏ— ｃ ｃ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｐｒｏｔｅｉｎ ｗ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆＩＬ－６ ａｎｄ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｔｏ ｔｒｅａｔ－ ｍｅｎｔ ｉｎｍｕｌｔｉｐｌｅ ｍｙｅｌｏｍａ ．Ａｃｔａ Ｈａｅｍａｔｏｌ，２０１２，１２８（４）：２１３－２２２． ［７］Ｍｕｓｏｌｉｎｏ Ｃ，Ａｌｌｅｇｒａ Ａ，Ｐｒｏｆｉｔａ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｒｅｄｕｃｅｄ ＩＬ一３３ ｐｌａｓｍａ ｌｅｖ— ｅｌｓ ｉｎ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｍｙｅｌｏｍａ ｐａｔｉｅｎｔｓ ａｒｅ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｍｏｒｅ ａｄｖａｎｃｅｄ ｓｔａｇｅ ｏｆｄｉｓｅａｓｅ［Ｊ］．ＢｒＪ Ｈａｅｍａｔｏｌ，２０１３，１６０（５）：７０９—７１０． （收稿日期：２０１３－０７—３０）