草莓组织培养

草莓的组织培养

一、茎尖 1．概述

李慧等人通过对草莓茎尖离体培养的试验研究表明：取草莓茎尖为外植体，

以0．35 mm大小为宜；用MS+0.5 mg/L 6-BA+O.2 mg/L NAA培养基．不定芽再生率高；以1/2 MS+O.1 mg/L IBA 生根效果最好。 2.结论

（1） 再生途径：草莓刚抽出的匍匐茎的茎尖

（2） 灭菌方法：洗去泥土、灰尘，再用自来水冲淋2～3h，置超净工作台上进

行75 ﹪乙醇和0．1 升汞不同时间的灭菌处理，最后用无菌水冲洗5～8次，接种于诱导培养基中。诱导培养基为MS+0．5 mg／L6一BA+0．2mg／L NAA+3 蔗糖(w／v)+0．5﹪卡拉胶，pH值为5.6～5.8。每个灭菌处理接种2O枚外植体，l5d后观察记录外植体的污染、死亡、无菌成活生长等情况。

（3） 培养基：①芽诱导试验，于MS培养基附加0．2 mg／L NAA、IAA、IBA不同

种类生长素的培养基中，20d后调查记录幼芽分化情况。②继代培养与扩大繁殖，MS培养基附加0.5 mg/L6-BA、0.01 mg/L NAA。③根诱导试验, 用1/2 MS附加不同浓度(mg/I )IBA 有0．05、0．1、0．2、0．5及不加IBA的5个处理.

（3） 条件：培养基均在1～ 1.1大气压下热压灭菌20min。培养温度(25±

2)℃ 。每日光照12h，光强2 000Lux。

3.参考文献

[1] 韩碧文，等．植物组织培养中器官建成的生理生化基础[J]．植物学通报，1993，10(2)：1-6．

[2] 孙敬三，桂耀林．植物细胞工程实验技术[M]．北京：北京工业大学出版社，1995．

二、胚状体 1.概述

郏艳虹,熊庆娥等人：对草莓丰香不同器官体细胞胚胎的诱导及形态发生进行了研究。结果表明培养基中激素种类与配比对各器官体细胞胚的诱导事均有明显影响。 2.结论

（1） 再生途径：用其花药、花蕾、叶、叶柄、子叶、下胚轴等作外植体进行离

体培养。

（2） 灭菌方法：洗去泥土、灰尘，再用自来水冲淋2～3h，置超净工作台上进

行75 ﹪乙醇和0．1 升汞不同时间的灭菌处理.

（3） 培养基：①MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L(浓度单位,下同)；②MS+6一

BA0.5+KT 0.5；③MS+BA2.0+IAA 1.0；④MS+BA2.0+NAA0.5+2,4-D0.1；⑤MS+BA2.0+IBA0.1。以上培养基各加CH 100 mg/L，蔗糖20g/ L(① 为30g/ L)。①用于花药诱导培养基；② 用于花药幺伤组织分化培养；③ 、④ 用

于其余5种外植体(叶盘、叶柄、下胚轴、子叶、花蕾)诱导培养；⑤仅用于花蕾培养。

（4） 条件：培养条件均为12 h光照12 h黑暗。光强度1200-1500lx、温度(25

±2)℃ 。

3. 参考文献： [1] 洪燕萍。林顺权．草莓离体培养研究进展【J】．福建农业学报。1999。14(2)：37—44． [2] 薛光荣。杨振英．朱秋英等．草莓花药培养获得无病毒植株的技术研究[J】．植物学通报。l900．7(1)：22—26．

[3] 史永忠。万蜀渊。薛光荣．草莓花药愈伤组织原生质体培养再生多细胞团[J]．华中农业大学学报。1995．14(2)：187一l9O． 三、叶片 1，概述

郑桂珍、来文国、王淑珍等人以红颊、章姬、丰香草莓叶片为试材，对影响草莓叶片不定芽再生的主要因素进行了试验研究，建立了草莓离体叶片的再生体系。试验结果表明，基因型、不同激素种类和配比直接影响了草莓叶片再生芽的发生。基因型是影响草莓叶片再生能力的决定因素，不同激素配比是不定芽产生的关键因素。叶片愈伤组织的诱导培养基以MS+TDZ 2~3mg／1较理想，芽伸长的理想培养基为MS+6一BA 0．3～O．5mg／l，生根培养基以1／2MS+IBA0．3mg／1较适宜，移栽成活率可达90％以上。 2.结论

（1） 再生途径：先采取当年生匍匐茎茎尖培养繁殖，建立起三个品种的无性繁

殖系；再从继代3周的无菌苗上剪取叶片作为外植体，进行不同的处理，每瓶接10片叶盘，每处理重复5瓶。

（2） 灭菌方法：于121℃下高温高压蒸汽灭菌20min。

（3） 培养基：基本培养基为MS培养基。茎尖培养与组培苗继代培养基为MS+6

一BA0．3～0.5mg/l+蔗糖2Og/l+琼脂7g/l，pH值为5．8，

（4） 条件：叶片接种在诱导培养基后，直接置于温度为25℃、光照强度为

20001x、光周期1 6h的培养条件下。

3. 参考文献： [1]于冬梅， 胡文玉, 王关林. 基因型和培养因子对诱导草莓叶片再生芽的影响. 沈阳农业大学学报, 1998, 29(2)：138～143．

[2]吴雪梅，汤浩茹．草莓叶片培养研究进展．果树学报, 2004，21(6)：598～602．

[3]袁维风，金万梅等．生长调节物质对草莓叶片再生不定芽的影响．植物生理学通讯, 2004，4O(6)：447～449．

[4]张志宏， 吴禄平，代红艳等．草莓主栽品种再生和转化的研究．园艺学报, 2001，28(3)：189～193．