发布网友 发布时间:2022-04-20 05:51
共2个回答
热心网友 时间:2023-06-25 18:26
约为0.2μm
光学显微镜的分辨率极限约为0.2μm;相隔小于该距离的两个对象显示为单个图像,而不是彼此区分开来。光学显微镜的这一理论*由两个因素决定——可见光的波长(λ)和显微镜镜头的聚光能力(数值孔径,NA)——根据以下等式:
Resolution=0.61λ/NA
可见光波长为0.4μm到0.7μm,因此对于光学显微镜,λ的固定值在0.5μm左右。数值孔径可以设想为穿过样品后进入显微镜镜头的光锥大小。它由等式给出:
NA=η sin α
其中η是光在样品和透镜之间传播介质的折射率。空气的η值为1.0,但可以通过使用油浸透镜通过一滴油观察样品,将其增加到大约1.4的最大值。角度α对应于透镜收集的光锥宽度的一半。α的最大值为90°,此时sin α=1,因此数值孔径的最高可能值为1.4。
因此,光学显微镜分辨率的理论极限可以计算如下:
Resolution=0.61×0.5/1.4=0.22μm
热心网友 时间:2023-06-25 18:26
光学显微镜最高的分辨率为0.61λ/NA 。
式子中d——物镜的分辨距离,
单位 nm。
λ——照明光线波长,单位nm。
NA ——物镜的数值孔径。
举例油浸物镜的数值孔径为1.25,
可见光波长范围为400—700nm ,
取其平均波长550 nm,则d=270 nm,
约等于照明光线波长一半。
一般地,用可见光照明的显微镜分辨力的极限是0.2μm.
显微镜的分辨力的大小由物镜的分辨力来决定的,
而物镜的分辨力又是由它的数值孔径和照明光线的波长决定的。