酶联免疫法间接法测抗体
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酶联免疫法中的间接法是一种广泛应用于抗体检测的策略。其基本原理是利用酶标记的抗体来检测已与固相载体结合的受检抗体，通过几个步骤实现。首先，特异性抗原与固相载体结合，形成固相抗原，然后通过洗涤去除未结合的物质。
接着，将待测血清（含特异性抗体）加入，抗体与固相抗原结合形成复合物，洗涤后仅保留特异性抗体，其他非特异性成分被去除。之后，添加酶标记的抗抗体，使抗体间接带上酶标记。洗涤后，固相载体上的酶含量反映了特异性抗体的浓度。例如，检测人对特定疾病抗体时，可使用酶标记的羊抗人IgG抗体作为标记。
间接法在病原体抗体检测和传染病诊断中扮演重要角色。其优势在于只需更换包被抗原，便能适应不同的抗体检测。然而，抗原纯度至关重要，纯化抗原可以提高检测的特异性。需要注意的是，抗原中不应含有能与血清中抗体反应的杂质，如E.Coli成分，以及可能引起假阳性的Ig物质。为了减少干扰，间接法中常使用无关蛋白质（如牛血清蛋白）封闭固相载体上的空隙，同时，标本需要适当稀释以避免阴性背景影响结果。
扩展资料
1971年瑞典学者Engvail和Perlmann,荷兰学者Van Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法，即酶联免疫吸附测定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA) 。ELISA现在已成为目前分析化学领域中的前沿课题 ，它是一种特殊的试剂分析方法，是在免疫酶技术( immunoenzymatic techniques ) 的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术 。
